|
تفاصيل المنتج:
|
| اسم المنتج: | طقم اختبار سريع لفيروس جدري القردة في الوقت الحقيقي PCR | قيمة ط م: | 35 |
|---|---|---|---|
| خزن: | -20 ℃ ± 5 ℃ | قنوات الكشف: | مألوف |
| دارة متكاملة: | مركز فيينا الدولي | LoD: | 200 نسخة / مل |
| تسليط الضوء: | مجموعة اختبار فيروس Monkeypox Virus PCR السريع,مجموعة اختبار Monkeypox PCR السريع,مجموعة PCR في مصل Monkeypox Real Time PCR |
||
طقم اختبار سريع لفيروس جدري القردة في الوقت الحقيقي PCR
الاستخدام المقصود
تستخدم هذه المجموعة في الكشف عن الحمض النووي النوعي في المختبر لفيروس جدري القردة في مصل الإنسان وعينات إفرازات الآفة وعينات المسحة.نتائج اختبار هذه المجموعة هي للإشارة السريرية فقط ولا ينبغي استخدامها كمعيار وحيد للتشخيص السريري.
جدري القرود هو مرض نادر حيواني المنشأ يتميز بثوران جلدي يسببه فيروس جدري القرود (MPV) والذي تشبه أعراضه السريرية مرض الجدري.ينتقل البشر بشكل رئيسي من خلال الحيوانات ، ويمكن أن يصابوا بجدر القرود من لدغات الحيوانات المصابة أو من الاتصال المباشر بدم الحيوانات المصابة وسوائلها وطفحها الجلدي ، ويمكن أيضًا أن ينتقل الفيروس من شخص لآخر.
تخصيص
| اسم المنتج | مجموعة PCR Virus Real Time |
| قنوات الكشف | مألوف |
| IC | مركز فيينا الدولي |
| قيمة ط م | 35 |
| الحد من الكشف | 200 نسخة / مل |
| تخزين | -20 ℃ ± 5 ℃ |
| وسائل النقل | تحت حالة التجمد |
| مدة الصلاحية | 12 شهر |
| نوع العينة | مسحات الأنف ، مسحة البلعوم ، اللعاب ، البول ، أنسجة الآفة ، الإفرازات ، والدم ، إلخ. |
| طَرد | 24 اختبار / مجموعة ، 48 اختبار / مجموعة ، 96 اختبار / مجموعة |
| عناصر | عازلة تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل ، خليط إنزيم PCR ، تحكم إيجابي ، تحكم سلبي |
مبدأ الاختبار
تعتمد هذه المجموعة على تقنية PCR الفلورية في الوقت الفعلي ، وهي مناسبة للكشف عن الحمض النووي لفيروس جدري القرود المستخرج من العينات السريرية مثل مصل الإنسان وعينات إفرازات الآفات وعينات المسحة. يمكن الكشف عن الحمض النووي لفيروس جدري القرود نوعيًا عن طريق جمع إشارة الفلورسنت الناتجة عن تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل.
بالإضافة إلى ذلك ، يتم إضافة بادئات محددة ومسبار الفلورسنت للتحكم القياسي الداخلي للكشف عن العينات السريرية البشرية إلى كل نظام تفاعل ، ويتم مراقبة عملية جمع ونقل واستخراج العينة المراد قياسها ، مما يشير إلى النتيجة السلبية الخاطئة لنتائج الاختبار .
نظام PCR في الوقت الحقيقي: Molarray MA-6000، ABI 7500، ViiATM 7، QuantStudio 5، QuantStudio 6/7 pro، QuantStudio 6/7 flex، Agilent Mx3000P / 3005P، Rotor-GeneTM 6000 / Q، Bio-Rad CFX96 TouchTM / iQTM 5 ، Hongshi SLAN-96S / 96P ، AGS8830 ، AGS4800.
عناصر
| تحديد | LQ-000301 24 ت |
LQ-000302 48 ت |
LQ-000303 96 ت |
| عازلة تفاعل PCR | 336 ميكرولتر × 1 أنبوب | 672 ميكرولتر × 1 أنبوب | 672 ميكرولتر × 2 أنبوب |
| خليط انزيم PCR | 30 ميكرولتر × 1 أنبوب | 50 ميكرولتر × 1 أنبوب | 100 ميكرولتر × 1 أنبوب |
| مراقبة إيجابية | 50 ميكرولتر × 1 أنبوب | 100 ميكرولتر × 1 أنبوب | 200 ميكرولتر × 1 أنبوب |
| سيطرة سلبية | 50 ميكرولتر × 1 أنبوب | 100 ميكرولتر × 1 أنبوب | 200 ميكرولتر × 1 أنبوب |
| تعليمات للاستخدام (قطعة) | 1 | 1 | 1 |
إجراءات
1. عينة الاستعدادات
يتم إجراء استخراج الحمض النووي من العينات السريرية وفقًا للمتطلبات والإجراءات المقابلة في مجموعة استخراج الحمض النووي للفيروس.المستخرج
يمكن استخدام الحمض النووي مباشرة للكشف.إذا لم يتم اكتشاف العينة مباشرة بعد الاستخراج ، فيجب تخزينها في درجة حرارة -70 درجة مئوية في وضع الاستعداد ، وتجنب دورات التجميد-الذوبان المتكررة.
2. إعداد نظام رد الفعل
(1) إعداد النظام: أخرج الكاشف من المجموعة ، واتركه يذوب تمامًا في درجة حرارة الغرفة.اقلب المزيج وجهاز الطرد المركزي على الفور.تم تحضير تفاعلات اختبار N (N = عدد العينات التي سيتم اختبارها + التحكم الإيجابي + التحكم السلبي + 1) لأنظمة التفاعل ، على التوالي ، على النحو التالي.
| عناصر | حجم نظام رد فعل واحد | حجم نظام التفاعل N. |
| عازلة تفاعل PCR | 14 ميكرولتر | 14 ميكرولتر ن |
| خليط انزيم PCR | 1 ميكرولتر | 1 ميكرولتر × ن |
| الحجم الكلي | 15 ميكرولتر | 15 ميكرولتر |
(2) توزيع نظام التفاعل: اخلط جيدًا المخزن المؤقت للتفاعل أعلاه ، وأجهزة الطرد المركزي ، ووزع 15 ميكرولتر من الكوات في أنابيب PCR مناسبة لأداة PCR الفلورية.(أجهزة الطرد المركزي لأنابيب PCR عند 6000 دورة في الدقيقة لمدة 30 ثانية ونقلها إلى منطقة معالجة العينة.)
3. تحميل العينة (منطقة معالجة العينة)
إضافة 10 ميكرولتر عينة من الحمض النووي والتحكم السلبي والتحكم الإيجابي لأنابيب PCR المذكورة أعلاه على التوالي.قم بتغطية الأنابيب بإحكام وطرد مركزي عند 6000 دورة في الدقيقة لمدة 10 ثوانٍ ثم نقلها إلى منطقة تضخيم PCR.
* التحذير: إضافة العينات بالترتيب التالي هي
موصى به: التحكم السلبي -> عينة الحمض النووي -> التحكم الإيجابي.
4. تضخيم PCR (منطقة تضخيم PCR)
4.1 ضع أنابيب PCR المغطاة في آلة PCR في الوقت الحقيقي للتضخيم.
4.2 إعداد حالة دورة الفلورة PCR
| برنامج | درجة الحرارة | مدة التفاعل | عدد الدورات |
|
1 |
50 درجة مئوية | 2 دقيقة | 1 |
| 2 | 95 درجة مئوية | 2 ثانية | 1 |
| 3 | 95 درجة مئوية | 1 ثانية | 41 |
| 60 درجة مئوية | 13s / 20s / 35s |
جمع إشارات الفلورسنت في الخطوة 3: 60 ؛35 ثانية لـ ABI 7500 ، و 20 ثانية لـ SLAN-96S / 96P ، بينما 13 ثانية لأنظمة PCR الأخرى في الوقت الفعلي.الحجم الكلي: 25 ميكرولتر.
4.3 التخلص بعد الكشف
تخلص من أنابيب PCR في كيس مغلق بعد التفاعل وتعامل مع الأنابيب المستخدمة على أنها نفايات طبية.
5. إعدادات لتحليل النتائج
تعيين خط الأساس في منطقة قبل التضخيم الأسي حيث تكون إشارات الفلورسنت لجميع العينات مستقرة نسبيًا (لا توجد تقلبات كبيرة في جميع العينات) ؛اضبط نقطة البداية (رقم الدورة) بعيدًا عن تقلبات الإشارة في البداية
مرحلة جمع الفلورة ؛اضبط نقطة النهاية (رقم الدورة) 1 ~ 3 دورات قبل Ct للعينة الأولى لإدخال التضخيم الأسي.يوصى بـ 4 ~ 15 دورة.
عيّن العتبة أعلى نقطة مباشرة من منحنى تضخيم التحكم السلبي (منحنى الضوضاء غير المنتظم).
6. معايير ضبط الجودة
قبل تقييم نتائج العينة ، يجب تفسير التحكم الإيجابي والتحكم السلبي باستخدام جدول التفسير أدناه ، ويجب تنفيذ منحنى التحكم الإيجابي والتحكم السلبي بشكل صحيح ، وإلا فإن نتيجة العينة غير صالحة.
| القنوات / ضوابط |
قيمة عتبة الدورة (Ct) | |
| مألوف | مركز فيينا الدولي | |
| مراقبة إيجابية | Ct> 40 أو UNDET | Ct> 40 أو UNDET |
| سيطرة سلبية | ط م 35 | ط م 35 |
7. تفسير نتائج الاختبار
قنوات FAM لفيروس Monkeypox Virus ، يجب تفسير نتيجة الكشف على النحو التالي.
أ) موجب: Ct 38 ومنحنى التضخيم على شكل S.
ب) المشتبه به: 38 <Ct ≤ 40 ومنحنى التضخيم على شكل حرف S ، يلزم إجراء اختبار ثانٍ.اعتبر موجبًا إذا كان Ct 40 ومنحنى التضخيم على شكل حرف S للاختبار الثاني.تعتبر سالبة إذا كانت Ct> 40 أو خالية Ct و Ct ≤ 35 في قناة VIC للاختبار الثاني.
ج) سلبي: Ct> 40 أو null Ct و Ct ≤ 35 في قناة VIC.
د) إعادة الاختبار: Ct> 40 أو null Ct و Ct> 35 في قناة VIC.
اتصل شخص: Ld
الهاتف :: +8613480985156
